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细菌RNA半衰期很短，RNA很容易发生降解。针对这一难题，本试剂盒采用溶菌酶与裂解液Buffer Rlysis-B共同作用，快速裂解样品，再通过氯仿抽提、无水乙醇沉淀等步骤，可获得浓度高、完整性好的RNA。适合于从各种来源的细菌（革兰氏阳性或阴性菌等）培养液中快速提取RNA。使用本试剂盒，从1mL对数生长期的细菌菌液中提取5～15μg总RNA，可直接用于RT-PCR、Northern Blot、斑点杂交等实验。

• 操作简单，全过程可在40分钟内完成。
  
• 完整性好，纯化的RNA几乎不会发生降解。
  
• 纯度高，OD260/280一般为2.0。

• 取1mL对数生长期的细菌，8000rpm 4℃离心1min，彻底弃掉培养基，加100μL溶菌酶，振荡混匀。（G-菌使用的溶菌酶浓度为400μg/mL，室温酶解3～5分钟；G+菌使用的溶菌酶浓度为3mg/mL，室温酶解5～10分钟。）
  
  • 收集菌体后可用500μL DEPC-treated ddH2O漂洗一次，10000rpm离心1分钟，弃上清，进一步去除残留的培养基。
• 立即加入900μL Buffer Rlysis-B震荡混匀，室温放置3min。
  
• 向裂解样品中加入200μL氯仿，充分混匀。12000rpm 4℃离心5min，取上清。
  
• 向上清液中加入1/3体积无水乙醇，混匀，室温放置3min，12000rpm 4℃离心5min，小心倒掉上清。
  
  • 离心后，在离心管底部，可能无肉眼可见的沉淀产生，属正常现象，请继续以下操作。
• 用700μL的75%乙醇（请用DEPC-treated ddH2O配制）洗涤沉淀，12000rpm 4℃离心3min，小心倒掉上清。
  
• 重复步骤5一次。
  
• 室温倒置10min，尽可能使离心管中残留的乙醇彻底挥发。加入30～50μL的DEPC-treated ddH2O溶解沉淀，立即使用或-70℃长期保存。
  
  • 如果残留的乙醇有挂壁现象，倒掉液体后再短暂离心，将残液用移液器吸出。然后开盖室温放置5～10分钟至残留的乙醇完全挥发。
    
  • 吸取残液时注意不要将RNA沉淀取出，避免RNA损失。